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          转基因元件adh1启动子LAMP试剂盒

          转基因元件adh1启动子LAMP试剂盒

          产品时间:2020-08-05

          访问量:183

          厂商性质:经销商

          生产地址:进口、国产

          简要描述:
          转基因元件adh1启动子LAMP试剂盒低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。阳性对照需要因易污染其他成分需要单独放置。本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供DN段作为阳性对照。
          品牌其他品牌CAS详见说明书
          分子式详见说明书纯度详见说明书
          分子量详见说明书货号GOYP63866
          规格50次供货周期现货
          主要用途公司产品仅用于科研应用领域化工
          产品名称 转基因元件adh1启动子LAMP试剂盒
          英文名称 Lamp kit for promoter of transgenic element Adh1
          规格 50次

           

          产品优势:
          1.随时可用。
          2.优化的缓冲液可增强特异性并减少引物二聚体的形成。
          3.高灵敏度,特异性和可靠性。
          4.为不同的qPCR仪器提供了被动参考染料。

          使用方法:
          产品仅用于科研一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
          1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DN段作为阳性对照。
          2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
          3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
          4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
          5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
          6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
          7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

          实验过程:
          一、试剂准备
          1. DNA模板
          2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步骤
          1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
          加ddH2O至               50 μl
          视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
          2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
          3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
          4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
          三、注意事项
          1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个的PCR实验室。
          2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
          3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
          4.PCR试剂配制应使用高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
          5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
          6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
          7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

          PCR实验步骤:
          ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
          ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
          ③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
          ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
          ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
          ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

          储存条件:
          仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
          1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
          2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
          3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
          4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
          5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 LCN2 Others Mouse 小鼠 LCN2 / NGAL 人细胞裂解液 (阳性对照) 胆壬酸酯(>89.0%(GC))质量规格:>89.0%(GC)Cholesterol Pelargonate
          3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞胆壬基碳酸酯质量规格:Cholesterol Nonyl Carbonate
          B2M Others Rat 大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 胆庚基碳酸酯质量规格:Cholesterol Heptyl Carbonate
          大鼠海马神经元细胞完全培养基 100mL胆油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))质量规格:>70.0%(HPLC)Cholesterol Oleyl Carbonate
          MDCK(NBL-2)狗肾细胞 MDCK (NBL-2) dog kidney cells MEM(GIBCO)+10%FBS熊果苷质量规格:≥98%,BRArbutin
          HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) eetonitnILEWITH0.1%GLACIALACETIC以,含0.1%HPLC级透明无色液体RT不sigma
          CL-0289MDA-MB-435(人癌高转移细胞)5×106cells/瓶×21,3,5-三肖基本;队称三肖基本 1,3,5-Trinitnobqnzqnq;syM-Trinitnobqnzqnq;Bqnzit;TNB 99-32-4
          TT细胞,髓性甲状腺癌细胞 人成巨核细胞白血病细胞,MEG-01细胞 人急性母细胞性白血病细胞;MOLT-4言醋哌卡应 Mqpivcccinq xy7nochloridq 2017/6/9
          4T1(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2矢车菊苷,英文名或英文缩写:Kuromanin chloride,级别:BR,99%,规格:20/240ug/支
          MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人细胞裂解液 (阳性对照) 28697-53-2D-阿拉伯糖D(-)-Arabinose
          UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮细胞系L-本甘酸盐酸盐shēng huà shì jì容量:100克
          CM-R105大鼠神经元细胞完全培养基100mL反玉米素核苷 trans-Zeatin-riboside,95% 6025-53-2 10MG 通用试剂
          CD226 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD22 人细胞裂解液 (阳性对照) 双酚AF Hqxcfluorobisphqnol c 1478-61-1
          小鼠肾小管上皮细胞MREpiCPVF聚醇缩5克AR,99%
          DU-145细胞,人前列腺癌细胞 小鼠脑瘤细胞,BC3H1细胞 人肺动脉成纤维细胞HPAF35037-73-1对三扶甲氧基本4-(Trifluorometxoxy)pxenyl isocyanate
          CL-0327Calu-6(人肺退行性癌细胞)5×106cells/瓶×2鸟嘌呤硫酸盐Guanine Sulfate质量规格:>98.0%,进口原装
          P3-X63-Ag8细胞,骨髓瘤细胞 人T细胞白血病细胞,A3细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0909腺嘌呤转基因元件adh1启动子LAMP试剂盒盐酸盐Adenine hydrochloride质量规格:>98%,BR
          5637(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2肌苷;核苷Inosine质量规格:>98.5%,BR
          FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人细胞裂解液 (阳性对照) 肌苷(标准品)Inosine质量规格:HPLC>98%,标准品
          人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100]5‘-腺嘌呤核苷酸二钠盐(AMP2Na)5'-AMP-Na2质量规格:>98%,BR

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