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          大鼠内脏脂肪细胞保存

          大鼠内脏脂肪细胞保存

          产品时间:2020-07-22

          访问量:137

          厂商性质:经销商

          生产地址:进口、国产

          简要描述:
          大鼠内脏脂肪细胞保存在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
          品牌其他品牌CAS详见说明书
          分子式详见说明书纯度详见说明书
          分子量详见说明书货号GOY-Y3461
          规格5×105/瓶供货周期现货
          主要用途公司产品仅用于科研应用领域化工

          以下是订购信息:

          产品名称英文名称货号
           大鼠内脏脂肪细胞保存Rat Fat: Normal Visceral Fat Cells GOY-Y3461

          大鼠内脏脂肪细胞【Rat Fat: Normal Visceral Fat Cells
               产品描述:公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的大鼠原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在公司生物技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
           冷冻保存细胞之方法?
          冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
          冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

           

          实验报告:

          一、分离与培养:产品仅供科研
              1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
              2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
              3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
              4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
              5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
          二、免疫荧光鉴定:
              1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
              2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
              3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
              4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
              5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
              6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

          下列是公司正在促销产品:

          小鼠血浆α颗粒膜蛋白elisa试剂盒   小鼠血浆α颗粒膜蛋白试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠血浆α颗粒膜蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血浆α颗粒膜蛋白试剂盒、小鼠血浆α颗粒膜蛋白eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  Betamipron  3440-28-6  中文名:倍他米隆  分子式:C10H11NO3 

          小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Boc-3-Phenylisoserine  中文名:  分子式:C14H19NO5 

          小鼠血红素氧合酶elisa试剂盒   小鼠血红素氧合酶试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠血红素氧合酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血红素氧合酶试剂盒、小鼠血红素氧合酶elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  Mizolastine  中文名:咪唑司汀  分子式:C24H25FN6O 

          小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Methylprednisolone hemisuccinate  中文名:  分子式:C26H34O8  度:98.0%

          小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Coumarin 7  中文名:香豆素分子式:C20H19N3O2  度:98.0%

          小鼠表皮生长因子受体(mouse EGF R)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Chlorogenic acid  327-97-9  中文名:绿原酸  分子式:C16H18O9 

          小鼠表皮生长因子elisa试剂盒   小鼠表皮生长因子试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠表皮生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠表皮生长因子试剂盒、小鼠表皮生长因子eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  Cholesterol  中文名:胆固醇  分子式:C27H46O  度:98.0%

          小鼠表皮生长因子(mouse EGF)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Chlorogenic acid  327-97-9  中文名:绿原酸  分子式:C16H18O9  度:98.0%  关键词:  抗病毒; 抗氧化; 莽草酸; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

          小鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Chlorotetracycline  57-62-5  中文名:金霉素  分子式:C22H23ClN2O8 

          小鼠表皮生长因子   英文名称:   epidermal growth factor-like growth factor   规格:   48T/96T   英文缩写:   EGF  Meclizine   1104-22-9  中文名:盐酸美克洛嗪  分子式:C25H29Cl3N2

          兔阿霉素(ADR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名:  分子式:C22H25N3O2 

          兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Aminoindole  中文名:5-氨基吲哚  分子式:C8H8N2 

          S100b   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装     4-Aminosalicylic acid  中文名:4-氨基水杨酸  分子式:C7H7NO3 

          S100A6蛋白   英文名称:   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   规格:   48T/96T   英文缩写:   S100A6  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名:4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式:C17H14N2O2  度:98.0%   

          P-选择素(rabbit P-selectin)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名:  分子式:C7H9N3O3

          Tenacigenoside A  中文名:  分子式:C35H56O12  度:兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

          Daturataturin A aglycone  中文名:  分子式:C28H38O5  度:93.0%  兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

          6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  中文名:  分子式:C29H46O2  度:兔内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

          Oleandrin  中文名:  分子式:C32H48O9  度:98.0%  兔内皮素(Endothelin-1ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

          β-Anhydrouzarigenin  中文名:  分子式:C23H32O3  度:97.0%  兔内皮抑素(rabbit ES)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装

          培养操作:

          大鼠内脏脂肪细胞保存1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
          2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
          1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
          2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
          3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
          4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
          3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
          1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
          2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
          3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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