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          人表皮角质形成细胞保存

          人表皮角质形成细胞保存

          产品时间:2020-07-16

          访问量:123

          厂商性质:经销商

          生产地址:进口、国产

          简要描述:
          人表皮角质形成细胞保存在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
          品牌其他品牌CAS详见说明书
          分子式详见说明书纯度详见说明书
          分子量详见说明书货号GOY-Y3293
          规格5×105/瓶供货周期现货
          主要用途公司产品仅用于科研应用领域化工

          以下是订购信息:

          产品名称英文名称货号
           人表皮角质形成细胞保存 Human Skin: Normal Epidermal Keratinocytes GOY-Y3293

          人表皮角质形成细胞【Human Skin: Normal Epidermal Keratinocytes
               产品描述:公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在公司生物技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
           冷冻保存细胞之方法?
          冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
          冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

           

          实验报告:

          一、分离与培养:产品仅供科研
              1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
              2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
              3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
              4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
              5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
          二、免疫荧光鉴定:
              1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
              2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
              3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
              4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
              5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
              6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

          下列是公司正在促销产品:

          猪活化素A(ACV-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Sunitinib malate  341031-54-7  中文名:苹果酸舒尼替尼  分子式:C26H33FN4O7 

          猪坏死因子αelisa试剂盒   猪坏死因子α试剂盒   规格型号:96T/48T   猪坏死因子α试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪坏死因子α试剂盒、猪坏死因子αeisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     Sarsasapogenin  126-19-2  中文名:菝葜皂苷元  分子式:C27H44O3 

          猪坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Sulfadiazine  中文名:磺胺嘧啶  分子式:C10H10N4O2S  度:99.0%

          猪坏死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sulfaguanidine  中文名:磺胺脒  分子式:C7H10N4O2S  度:99.0%

          猪红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Sulfamethazine  中文名:磺胺二甲嘧啶  分子式:C12H14N4O2S  度:99.0%

          小鼠羟甲基赖酸(mouse CML)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Dioscin  19057-60-4  中文名:薯蓣皂苷  分子式:C45H72O16  度:98.5%  关键词:  溶血; 细胞毒; 抗真菌; 薯蓣属; 螺甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

          小鼠强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Gliclazide  中文名:格列齐特  分子式:C15H21N3O3S 

          小鼠前心肽elisa试剂盒   小鼠前心肽试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠前心肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠前心肽试剂盒、小鼠前心肽eisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     Glycoursodeoxycholic acid  64480-66-6  中文名:甘氨熊脱氧胆酸  分子式:C26H43NO5 

          小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Gliclazide  21187-98-4  中文名:格列齐特  分子式:C15H21N3O3S  度:98.0%  关键词: 

          小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Glaucogenin C mono-D-thevetoside  中文名:  分子式:C28H40O9  度:98.0%

          线粒体复合物II蛋白共沉淀分析试剂盒5  2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide  中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚  分子式:C12H10N2O2S  度:98.0%

          线粒体复合物II蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25  2-Amino-3-methylbenzoic acid  4389-45-1  中文名:2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式:C8H9NO2  度:98.0%   

          线粒体复合物III蛋白共沉淀分析试剂盒5  2-Amino-4-methylbenzothiazole  1477-42-5  中文名:2-氨基-4-甲基苯并噻唑  分子式:C8H8N2S  度:98.0%   

          线粒体复合物III蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25  2-Amino-5-nitrobenzophenone  中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式:C13H10N2O3  度:98.0%

          线粒体促凋亡蛋白 (SMAC)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Atrazine  1912-24-9  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5  度:98.0%  关键词:

          人信号素4D(SEMA4D)酶联吸附测定试剂盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit                    3,3-Dimethylacrylic acid  中文名:千里光酸  分子式:C5H8O2 

          人心肌锚蛋白重复域1elisa试剂盒   人心肌锚蛋白重复域1试剂盒   规格型号:96T/48T   人心肌锚蛋白重复域1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人心肌锚蛋白重复域1试剂盒、人心肌锚蛋白重复域1 elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     3-(Boc-Amino)piperidine  中文名:  分子式:C10H20N2O2 

          人相关抗原(TAA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名:  分子式:C19H16FNO  度:98.0%

          人腺苷三0酸结合盒转运体G1(ABCG1)酶联吸附测定试剂盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名:  分子式:C19H20N4  度:98.0%

          人腺苷三0酸结合盒转运体A1(ABCA1)酶联吸附测定试剂盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit                 2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名:  分子式:C19H20N4

          人表皮角质形成细胞保存培养操作:

          1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
          2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
          1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
          2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
          3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
          4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
          3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
          1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
          2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
          3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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