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          小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA试剂盒操作步骤

          发布时间:2021-09-15   点击次数:174次

          小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA试剂盒操作步骤:


          1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

          2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

          3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

          4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

          5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

          6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

          7. 温育:操作同3。

          8. 洗涤:操作同5。

          9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

          10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

          11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

          类固醇受体复合物蛋白FKBP5抗体

          纤维性鞘结合蛋白1抗体

          纤维细胞生长因子结合蛋白2抗体

          肌动蛋白结合蛋白Fascin3抗体

          结构特异性核酸酶FEN1抗体

          FAM61B蛋白抗体

          FAM63A蛋白抗体

          上皮分泌型FAM3C蛋白抗体

          FAM36A蛋白抗体

          FAM50A蛋白抗体

          FAM134C蛋白抗体

          凝溶胶蛋白家族Fli-1抗体

          乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白9抗体

          卵泡抑素相关蛋白5抗体

          叉头相关转录因子C2抗体

          Fbx15蛋白抗体

          FRMD2蛋白抗体

          FAM98B蛋白抗体

          FAM50C蛋白抗体

          FAM91A1蛋白抗体

          FRMD1蛋白抗体

          髓鞘缺陷相关蛋白抗体

          叉头蛋白B1+B2抗体

          叉头蛋白G1抗体

          肿瘤/睾丸抗原抗体112抗体

          微管动力调节蛋白FAM82A抗体

          FAM50B蛋白抗体

          形成素2抗体


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