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          酸性成纤维细胞生长因子1elisa试剂盒操作步骤

          发布时间:2020-10-22   点击次数:239次

          酸性成纤维细胞生长因子1elisa试剂盒操作步骤:

          1)酸性成纤维细胞生长因子1elisa试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
          2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
          3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
          4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
          5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
          6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
          7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
          8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
          9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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